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原位雜交是一種重要的實(shí)時(shí)定量PCR檢測方法

更新時(shí)間:2023-02-25 點(diǎn)擊量:709
   原位雜交是一種重要的生物技術(shù)手段,主要利用DNA雙鏈分子和特異性Probe分子建立原位雜交反應,當Probe分子靠近DNA雙鏈時(shí),Probe分子上的特異性引物將在DNA雙鏈上的特異序列處引發(fā)雙鏈鏈接,從而形成一個(gè)叫做雜交的物料,然后利用特異的標記物及檢測儀器,反映其存在與否及定量?jì)热荨?div> 
  原位雜交是利用原位雜交儀將特異性的核酸直接定量地檢測到實(shí)時(shí)熒光發(fā)射,從而將基因表達水平空間化地進(jìn)行定量檢測,集成了變性/雜交、雜交、多步運行三種操作模式,適用于各種原位雜交實(shí)驗,是一種重要的實(shí)時(shí)定量PCR檢測方法。
 
  儀器特點(diǎn):
 
 ?。?)敏感性高:非特異性污染非常低,可以檢測非常少量的mRNA、DNA等物質(zhì),具有很強的敏感性。
 
 ?。?)靈敏度高:由于具有單一分子靈敏度,比傳統的定量PCR方法更加靈敏,可以快速檢測微量物質(zhì)的變化情況。
 
 ?。?)節省時(shí)間:與傳統的PCR定量方法相比,原位雜交儀不需要建立分子生物學(xué)實(shí)驗,只需在準備好的裝置上放置樣品和Probe,就可以節省大量的實(shí)驗時(shí)間。
 
 ?。?)精確度高:可以精確地測量和檢測具有特異性標記或Probe物質(zhì)的變化,可以更準確地定量和計算細胞內的mRNA和DNA含量,確保定量結果的準確性。
 
 ?。?)高通量:在同一儀器上可以對多種不同的環(huán)境或細胞樣品進(jìn)行同步檢測,實(shí)現大量樣品、少量試驗、快速實(shí)驗,從而實(shí)現了高通量檢測和實(shí)驗效率。
 
  原位雜交儀作為一種重要的定量PCR方法,已深受臨床、醫學(xué)和生物學(xué)研究領(lǐng)域的青睞,在基因組學(xué)、藥物研發(fā)、新藥篩選等領(lǐng)域中得到廣泛應用。它不僅可以對基因表達水平進(jìn)行定量檢測,而且可以檢測少量物質(zhì)的變化情況,更能夠精確地測量和計算DNA和mRNA的含量,具有非常重要的臨床研究?jì)r(jià)值。
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